藥物濃度監(jiān)測(cè)在臨床治療和藥物研發(fā)中至關(guān)重要，其準(zhǔn)確性直接影響治療效果和安全性。傳統(tǒng)方法如高效液相色譜（HPLC）和質(zhì)譜（MS）雖準(zhǔn)確性高，但存在設(shè)備昂貴、操作復(fù)雜、耗時(shí)較長(zhǎng)等缺點(diǎn)。免疫分析法（如ELISA）雖快速，但特異性受交叉反應(yīng)影響。因此，開發(fā)一種快速、靈敏且操作簡(jiǎn)便的檢測(cè)技術(shù)具有重要意義。

博清生物科技（南京）有限公司研發(fā)的熒光計(jì)采用熒光檢測(cè)原理，適配Qubit系列試劑，支持dsDNA、ssDNA、RNA及蛋白質(zhì)的特異性檢測(cè)，檢測(cè)靈敏度高（dsDNA低至0.01ng/μL），樣本量?jī)H需1-20μL。本研究旨在探索其在藥物濃度監(jiān)測(cè)中的應(yīng)用。

一、材料與方法

（一）儀器與試劑

1、儀器：博清生物熒光計(jì)（適配Qubit系列試劑）、HPLC系統(tǒng)（用于對(duì)比）。

2、試劑：磺胺類抗生素標(biāo)準(zhǔn)品、環(huán)孢素標(biāo)準(zhǔn)品、Qubit熒光定量試劑盒、熒光免疫層析試紙條。

（二）樣本制備

1、抗生素檢測(cè)：將動(dòng)物組織勻漿后，采用乙腈提取磺胺類抗生素，離心后取上清液。

2、免疫抑制劑檢測(cè)：采集患者全血，分離血漿后直接使用。

（三）檢測(cè)方法

1、熒光免疫法：將藥物特異性熒光標(biāo)記抗體與樣本混合，通過博清生物熒光計(jì)檢測(cè)熒光強(qiáng)度，計(jì)算藥物濃度。

2、HPLC法：采用C18色譜柱，流動(dòng)相為乙腈-水（60:40，v/v），檢測(cè)波長(zhǎng)254nm。

（四）數(shù)據(jù)分析

通過標(biāo)準(zhǔn)曲線計(jì)算藥物濃度，并比較兩種方法的線性范圍、檢測(cè)限及重復(fù)性。

二、結(jié)果與討論

（一）檢測(cè)性能評(píng)估

1、線性范圍與檢測(cè)限：磺胺類抗生素在5-50μg/kg 范圍內(nèi)線性良好（R2>0.99），檢測(cè)限為0.5μg/kg；環(huán)孢素在10-200ng/mL 范圍內(nèi)線性良好（R2>0.99），檢測(cè)限為5ng/mL。博清生物熒光計(jì)的檢測(cè)限顯著低于HPLC（磺胺類HPLC檢測(cè)限為2μg/kg，環(huán)孢素為10ng/mL）。

2、重復(fù)性：批內(nèi)變異系數(shù)（CV）<3%，批間CV<5%，顯示良好的精密度。

（二）與傳統(tǒng)方法的比較

1、檢測(cè)速度：博清生物熒光計(jì)單次檢測(cè)<10秒，而HPLC需30分鐘以上。

2、樣本需求：熒光計(jì)僅需1-20μL樣本，HPLC需100μL以上。

3、抗干擾能力：熒光計(jì)通過特異性熒光標(biāo)記抗體排除基質(zhì)干擾，而HPLC需復(fù)雜樣本前處理。

（三）臨床應(yīng)用潛力

在模擬臨床樣本檢測(cè)中，博清生物熒光計(jì)對(duì)環(huán)孢素的檢測(cè)結(jié)果與HPLC具有良好的相關(guān)性（R2=0.98），且操作更簡(jiǎn)便，適合床旁檢測(cè)（POCT）。

博清生物科技（南京）有限公司研發(fā)的熒光計(jì)在藥物濃度監(jiān)測(cè)中表現(xiàn)出快速、高靈敏度、操作簡(jiǎn)便等優(yōu)勢(shì)，尤其適用于抗生素和免疫抑制劑的檢測(cè)。其性能優(yōu)于傳統(tǒng)方法，具有廣闊的臨床應(yīng)用前景。未來可進(jìn)一步探索其在多藥物聯(lián)合檢測(cè)和自動(dòng)化集成中的潛力。

未來研究可進(jìn)一步優(yōu)化熒光標(biāo)記技術(shù)，提高檢測(cè)通量（如多通道設(shè)計(jì)），并開展臨床樣本驗(yàn)證，以推動(dòng)博清生物熒光計(jì)在藥物濃度監(jiān)測(cè)中的廣泛應(yīng)用。此外，結(jié)合人工智能算法進(jìn)行數(shù)據(jù)分析，有望進(jìn)一步提升檢測(cè)準(zhǔn)確性和效率。